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Fluorospot et Elispot

Évaluations sensibles et robustes de la fréquence des cellules sécrétrices de cytokines au niveau de la cellule unique.

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Scientist performing FluoroSpot immunoassay in a clinical laboratory

Un profilage immunitaire riche en informations

Notre équipe possède une expertise en Fluorospot et Elispot (Enzyme-Linked Immunosorbent Spot) pour les PBMC, ainsi qu'en personnalisation et validation de ces essais pour des critères d'évaluation exploratoires, primaires et secondaires en clinique.

La sensibilité robuste de nos essais Fluorospot et Elispot en fait un excellent complément pour de nombreux programmes thérapeutiques. Leurs applications cliniques sont vastes, incluant la caractérisation des réponses immunitaires préexistantes, le suivi de l'immunogénicité des vaccins et l'évaluation de l'immunothérapie.

Principales caractéristiques de la plateforme

Elispot et Fluorospot fournissent un décompte hautement sensible des réponses fonctionnelles spécifiques à l'antigène au niveau de la cellule unique.

Ces essais nécessitent seulement un petit nombre de cellules, permettent des stimulations multiples et impliquent une manipulation cellulaire minimale, sans fixation ni perméabilisation requise.

Elispot utilise une action enzymatique pour mesurer la sécrétion d'une seule cytokine, révélant des informations essentielles sur l'immunité à médiation cellulaire. Tous les décomptes de SFU obtenus sont standardisés à l'aide de l'analyseur ImmunoSpot® S6 Universal.

Par exemple, CellCarta peut facilement suivre les réponses des lymphocytes T mémoire à l'aide d'un essai Elispot adapté à la détection de l'IFNγ. Cet essai est facilement disponible pour un usage exploratoire et peut être validé pour des critères d'évaluation secondaires et primaires.

Fluorospot utilise des anticorps marqués par fluorophores pour une détection directe en une seule étape, permettant l'analyse simultanée de plusieurs analytes dans un même puits. Cette technologie permet non seulement d'identifier les cellules produisant chaque analyte individuellement, mais aussi de détecter les cellules coproduisant simultanément plusieurs analytes.

Nous avons validé plusieurs essais Fluorospot multiplex, notamment :

  • Essai lymphocytes T : IFNγ et IL-4
  • Essai lymphocytes B : IgM, IgG, IgA

Les scientifiques de CellCarta peuvent personnaliser les essais Elispot et Fluorospot selon la stimulation antigénique sélectionnée et le type cellulaire étudié.

Notre processus de personnalisation suit un cadre de validation bien établi, conçu pour produire des essais optimisés et reproductibles. Que votre étude nécessite une conception simplex ou multiplex, notre équipe adapte son approche à votre protocole plutôt que d'adapter votre programme à un modèle standard.

Elispot et Fluorospot fournissent un décompte hautement sensible des réponses fonctionnelles spécifiques à l'antigène au niveau de la cellule unique.

Ces essais nécessitent seulement un petit nombre de cellules, permettent des stimulations multiples et impliquent une manipulation cellulaire minimale, sans fixation ni perméabilisation requise.

Scientist analysing ELISpot plate at single-cell level

Elispot utilise une action enzymatique pour mesurer la sécrétion d'une seule cytokine, révélant des informations essentielles sur l'immunité à médiation cellulaire. Tous les décomptes de SFU obtenus sont standardisés à l'aide de l'analyseur ImmunoSpot® S6 Universal.

Par exemple, CellCarta peut facilement suivre les réponses des lymphocytes T mémoire à l'aide d'un essai Elispot adapté à la détection de l'IFNγ. Cet essai est facilement disponible pour un usage exploratoire et peut être validé pour des critères d'évaluation secondaires et primaires.

ELISpot assay plate for IFN-gamma detection

Fluorospot utilise des anticorps marqués par fluorophores pour une détection directe en une seule étape, permettant l'analyse simultanée de plusieurs analytes dans un même puits. Cette technologie permet non seulement d'identifier les cellules produisant chaque analyte individuellement, mais aussi de détecter les cellules coproduisant simultanément plusieurs analytes.

Nous avons validé plusieurs essais Fluorospot multiplex, notamment :

  • Essai lymphocytes T : IFNγ et IL-4
  • Essai lymphocytes B : IgM, IgG, IgA
Multiplex FluoroSpot fluorophore detection plate

Les scientifiques de CellCarta peuvent personnaliser les essais Elispot et Fluorospot selon la stimulation antigénique sélectionnée et le type cellulaire étudié.

Notre processus de personnalisation suit un cadre de validation bien établi, conçu pour produire des essais optimisés et reproductibles. Que votre étude nécessite une conception simplex ou multiplex, notre équipe adapte son approche à votre protocole plutôt que d'adapter votre programme à un modèle standard.

Scientist customizing ELISpot assay in laboratory
Scientists reviewing FluoroSpot clinical application data

Elispot ou ICS ?

Savoir quand utiliser Elispot plutôt que l'ICS pour évaluer la réponse immunitaire, en particulier pour les lymphocytes T, peut s'avérer complexe. Nos scientifiques présentent les considérations clés pour ces deux essais afin d'optimiser votre workflow de suivi immunitaire selon les spécifications de votre étude.

Applications clés

Les essais Fluorospot et Elispot de CellCarta peuvent soutenir le suivi de l'immunogénicité des vaccins, la cartographie des épitopes, la détection des réponses restreintes par le CMH, les réponses des lymphocytes B et T, les modèles de coculture avec cellules dendritiques, ainsi que l'analyse de populations cellulaires sélectionnées dans les programmes en oncologie, maladies infectieuses et maladies auto-immunes.

Scientists reviewing FluoroSpot clinical application data

Pourquoi CellCarta

Des essais de référence pour mesurer la sécrétion de cytokines et la réponse immunitaire.

Sensibilité supérieure

Capacités de multiplexage

Intégration clinique facile

Développement d'essais personnalisés

Expertise en biomarqueurs immunitaires

Vous cherchez un partenaire expert en immunologie ?

Les scientifiques de CellCarta sont disponibles pour discuter de vos besoins en matière d'essais, du profilage immunitaire exploratoire aux essais validés pour critères d'évaluation primaires dans les essais cliniques.

CellCarta immunology scientist reviewing assay data

Foire aux questions

Elispot (Enzyme-Linked Immunosorbent Spot) est un immunodosage qui mesure la fréquence des cellules sécrétrices de cytokines spécifiques à l'antigène au niveau de la cellule unique. Il s'appuie sur des principes d'immunodosage bien connus et se caractérise par sa haute sensibilité. L'essai nécessite un petit nombre de cellules, permet des stimulations multiples et évite le besoin de fixation ou de perméabilisation, ce qui simplifie le workflow et préserve la fonction cellulaire. Notamment, Elispot est un essai simplex, c'est-à-dire qu'une seule cytokine peut être analysée par run.

Fluorospot détecte les cellules sécrétrices d'analytes à l'aide d'anticorps marqués par des fluorophores plutôt que par des enzymes, ce qui se traduit par une méthode de détection directe en une seule étape, comparée au système en deux étapes d'Elispot. L'avantage pratique clé de Fluorospot est sa capacité à analyser plusieurs analytes dans un même puits, en identifiant les cellules produisant chaque analyte individuellement ainsi que celles produisant les deux analytes simultanément. Cela rend Fluorospot particulièrement adapté aux programmes nécessitant un profilage simultané des cytokines.

Oui. L'équipe de CellCarta personnalise les essais Fluorospot et Elispot selon la stimulation antigénique sélectionnée et le type cellulaire étudié. Le processus de personnalisation suit un cadre de validation bien établi, aboutissant à des essais optimisés selon la conception spécifique de l'étude de chaque promoteur. Les scientifiques possèdent une vaste expérience dans le développement d'essais pour un usage exploratoire ainsi que pour des critères d'évaluation secondaires et primaires dans les essais cliniques.

Les essais Elispot et Fluorospot soutiennent un large éventail d'applications cliniques, notamment le suivi de l'immunogénicité des vaccins, des thérapies cellulaires et des thérapies immunomodulatrices telles que les cellules CAR-T, les inhibiteurs de points de contrôle, les cytokines, les agonistes et les adjuvants. Ils sont également utilisés pour la cartographie à grande échelle des épitopes, la détection des réponses restreintes par le CMH, et la mesure des réponses des lymphocytes B et T mémoire à partir d'échantillons de PBMC. Dans l'ensemble des domaines thérapeutiques, ces essais sont appliqués en oncologie, dans les maladies infectieuses, les maladies auto-immunes et les maladies rares.

Elispot et le marquage intracellulaire des cytokines (ICS) mesurent tous deux les réponses des lymphocytes T spécifiques à l'antigène, mais chacun présente des avantages pratiques distincts. Elispot montre généralement une sensibilité supérieure à l'ICS, ce qui le rend particulièrement adapté à la détection de réponses spécifiques à l'antigène de faible fréquence. Il nécessite également moins de cellules et évite les étapes de fixation et de perméabilisation. L'ICS, en revanche, fournit des informations sur la sous-population cellulaire exprimant les cytokines d'intérêt et permet de caractériser les sous-ensembles de lymphocytes T producteurs de cytokines selon leur phénotype de surface. Le choix approprié dépend des exigences du critère d'évaluation de l'étude et des informations recherchées.

Pour en savoir plus, consultez notre article sur l'ICS et l'Elispot pour les essais cliniques et consultez nos experts.