ELISpot et FluoroSpot

Les tests ELISpot (Enzyme-Linked Immunosorbent Spot) et FluoroSpot s’appuient sur les principes bien connus des immunodosages pour évaluer la fréquence des cellules sécrétrices de cytokines spécifiques à un antigène à l’échelle de la cellule. Grâce à leur grande sensibilité, ces tests peuvent détecter des réponses spécifiques d’un antigène de faible intensité et être utilisés pour compléter les résultats d’autres analyses fonctionnelles, telles que la coloration intracellulaire de cytokines par cytométrie en flux et le test ELISA.

Les tests ELISpot et FluoroSpot sont utilisés pour caractériser des réponses immunitaires préexistantes, déterminer l’immunogénicité des vaccins et évaluer les effets de traitements immunomodulateurs dans des domaines tels que le cancer, les maladies infectieuses, les maladies auto-immunes et les maladies rares/orphelines.

Nos scientifiques possèdent une vaste expérience dans l’adaptation et la validation du test ELISpot pour des antigènes spécifiques afin de permettre son utilisation dans l’évaluation de critères exploratoires, secondaires ou primaires lors d’études cliniques.

Le test ELISpot est une approche efficace qui ne requiert qu’un petit nombre de cellules, permettant de multiples stimulations, et qui ne nécessite que très peu de manipulations (pas de fixation, ni de perméabilisation des cellules). Il s’agit aussi d’une méthode très sensible qui affiche généralement une sensibilité plus élevée que celle de la coloration de cytokines intracellulaires.

CellCarta possède également une expertise avec le test ELISpot effectué sur des populations de cellules en culture permettant le suivi de la réponse des lymphocytes T mémoire.

Test ELISpot adapté à la détection de l’IFN-γ  

• Rapidement disponible pour la mesure de critères d’évaluation exploratoires et pouvant être validé pour la mesure de critères d’évaluation secondaires et primaires
• Validation effectuée sur des cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) cryoconservées
• Normalisation du nombre d’unités formant des points (SFU) à l’aide de l’analyseur ImmunoSpot^® S6 Universal

Le test FluoroSpot détecte les cellules sécrétrices d’analytes à l’aide d’anticorps marqués par des fluorophores au lieu d’enzymes, ce qui permet une détection directe en une étape par rapport au système de détection en deux étapes du test ELISpot.

Le test FluoroSpot a également l’avantage de permettre l’analyse de plusieurs analytes dans un seul puits. La technologie permet d’identifier les cellules produisant chaque analyte ainsi que celles les produisant tous les deux.

Notre équipe expérimentée peut personnaliser les tests ELISpot et FluoroSpot en fonction de la stimulation antigénique choisie et du type de cellules étudié. Le processus de validation bien établi que nous suivons se traduit par des analyses optimisées et assure la fiabilité de nos résultats.

• Surveillance de l’immunogénicité des vaccins, des thérapies cellulaires et des thérapies immunomodulatrices (CAR-T, inhibiteurs de point de contrôle, cytokines, agonistes et adjuvants)
• Cartographie des épitopes à grande échelle
• Détection des réponses restreintes par le type HLA
• Mesure des réponses immunitaires des lymphocytes B et T mémoires à partir de PBMC
• Évaluation de la réponse immunitaire de lymphocytes T cultivés avec des cellules dendritiques
• Génération de données quantitatives caractéristiques des populations choisies et isolées par des techniques de séparation de cellules telles que la séparation magnétique sur colonne