Suivi longitudinal de la dynamique de prolifération cellulaire et du cycle cellulaire par cytométrie en flux.
L'expertise de CellCarta en cytométrie en flux permet une compréhension fluide de vos cellules et de leur comportement dynamique. Nous adaptons notre flux de travail aux spécifications de votre étude, avec plusieurs dosages de prolifération cellulaire disponibles pour une utilisation dans des échantillons tissulaires et de biopsie liquide.
Notre analyse ne s'arrête pas là. Notre flux de travail peut intégrer des marqueurs de surface et intracellulaires supplémentaires dans notre processus de prolifération pour une compréhension approfondie de vos sous-populations cellulaires.
Nous utilisons la cytométrie en flux pour établir le profil phénotypique et fonctionnel de sous-populations immunitaires distinctes à partir de sang total, de cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC), d'aspirats de moelle osseuse (BMA), de liquide céphalorachidien (LCR) et d'échantillons de tissus dissociés, mesurant à la fois l'activité proliférative et l'identité de surface cellulaire dans un seul dosage.
Notre dosage CFSE (ester succinimidylique de carboxyfluorescéine) qualifié quantifie la prolifération en suivant la dilution du colorant à travers les divisions cellulaires successives. Adapté pour mesurer la réponse cellulaire au traitement clinique et aux stimulations in vitro, il fournit un indice de prolifération fiable pour chaque sous-population cellulaire analysée.
Ki-67 est utilisé comme marqueur d'activation précoce pour identifier les cellules entrant dans un nouveau cycle cellulaire. Exprimé dans toutes les phases cellulaires actives (G1, S, G2 et M) mais absent des cellules au repos (G0), Ki-67 offre une fenêtre directe sur l'activité de cyclage au sein de vos sous-populations cellulaires d'intérêt.
La mesure de la synthèse d'ADN basée sur la bromodésoxyuridine (BrdU) permet de détecter les cellules nouvellement en prolifération grâce à leur incorporation dans l'ADN nouvellement synthétisé. Cette technique complète les approches de dilution de colorant et basées sur les protéines lorsqu'une quantification directe de la synthèse d'ADN est requise.
Nous utilisons la cytométrie en flux pour établir le profil phénotypique et fonctionnel de sous-populations immunitaires distinctes à partir de sang total, de cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC), d'aspirats de moelle osseuse (BMA), de liquide céphalorachidien (LCR) et d'échantillons de tissus dissociés, mesurant à la fois l'activité proliférative et l'identité de surface cellulaire dans un seul dosage.
Notre dosage CFSE (ester succinimidylique de carboxyfluorescéine) qualifié quantifie la prolifération en suivant la dilution du colorant à travers les divisions cellulaires successives. Adapté pour mesurer la réponse cellulaire au traitement clinique et aux stimulations in vitro, il fournit un indice de prolifération fiable pour chaque sous-population cellulaire analysée.
Ki-67 est utilisé comme marqueur d'activation précoce pour identifier les cellules entrant dans un nouveau cycle cellulaire. Exprimé dans toutes les phases cellulaires actives (G1, S, G2 et M) mais absent des cellules au repos (G0), Ki-67 offre une fenêtre directe sur l'activité de cyclage au sein de vos sous-populations cellulaires d'intérêt.
La mesure de la synthèse d'ADN basée sur la bromodésoxyuridine (BrdU) permet de détecter les cellules nouvellement en prolifération grâce à leur incorporation dans l'ADN nouvellement synthétisé. Cette technique complète les approches de dilution de colorant et basées sur les protéines lorsqu'une quantification directe de la synthèse d'ADN est requise.
Nos dosages de prolifération cellulaire sont conçus pour le domaine clinique. Leurs utilisations comprennent l'évaluation de la fonctionnalité et de la réactivité des cellules immunitaires, la détermination de l'indice de prolifération des sous-populations cellulaires, l'identification des cellules en prolifération active, et le suivi de la réponse au traitement et de l'évolution de la maladie dans le temps.
Mise en œuvre experte des dosages de prolifération cellulaire pour des perspectives cellulaires riches.
Validé pour un usage clinique
Options de profilage étendues
Exécution mondiale
Expertise multi-techniques
Protocoles validés de manière croisée
Les dosages de prolifération cellulaire fournissent un aperçu direct et quantitatif de la façon dont les cellules immunitaires réagissent au traitement. En mesurant la prolifération cellulaire grâce à un flux de travail basé sur la cytométrie en flux, votre programme peut déterminer l'indice de prolifération d'une sous-population cellulaire spécifique, identifier les populations activement en division, et suivre les changements dans le comportement de cyclage cellulaire tout au long du traitement ou de la maladie.
Un avantage clé est la capacité de comparer la réactivité des cellules immunitaires entre des individus malades et en bonne santé au sein de la même étude. Combinés à des marqueurs de surface et intracellulaires supplémentaires, les dosages de prolifération cellulaire offrent des perspectives complètes et étendues sur des sous-populations cellulaires spécifiques, allant au-delà d'un simple comptage cellulaire pour révéler des informations phénotypiques et fonctionnelles.
Nous utilisons plusieurs techniques pour suivre les cellules pendant le processus de prolifération : le BrdU, qui mesure la synthèse d'ADN en s'incorporant dans l'ADN nouvellement synthétisé ; le CFSE, qui quantifie la prolifération en suivant la dilution du colorant à travers les générations ; et des protéines marquées associées au cycle cellulaire (par exemple, Ki-67 et PCNA - antigène nucléaire de prolifération cellulaire) pour surveiller la dynamique cellulaire. Chaque technique peut être sélectionnée en fonction des exigences spécifiques de votre programme.
Nos dosages de prolifération cellulaire peuvent s'adapter à un large éventail de types d'échantillons cliniques, y compris le sang total, les PBMC (frais et cryoconservés), les échantillons de tissus et de tumeurs, les BMA, les biopsies par aspiration à l'aiguille fine, le LCR et les lignées cellulaires. L'adéquation du type d'échantillon peut être confirmée lors des consultations initiales avec nos experts scientifiques.
Le CFSE (ester succinimidylique de carboxyfluorescéine) suit la dilution du colorant dans le temps pour quantifier la prolifération cellulaire. Lorsqu'une cellule marquée se divise, le signal fluorescent est distribué également entre les cellules filles, permettant de distinguer chaque génération successive. CellCarta propose un dosage CFSE qualifié adapté à la mesure de la prolifération cellulaire en réponse au traitement clinique et aux stimulations in vitro.
Ki-67 est utilisé comme marqueur d'activation précoce pour identifier les cellules qui sont entrées dans un nouveau cycle cellulaire. L'antigène nucléaire Ki-67 est exprimé dans toutes les phases actives du cycle cellulaire (G1, S, G2, M) et est absent des cellules au repos en phase G0. CellCarta combine le Ki-67 avec des marqueurs de surface et intracellulaires supplémentaires pour fournir des perspectives fonctionnelles étendues sur des sous-populations cellulaires spécifiques.
CellCarta a démontré une cohérence inter-sites grâce à une étude d'alignement d'instruments multi-sites qui a normalisé plus de 10 dosages dans cinq laboratoires mondiaux simultanément. L'étude a atteint plus de 80 % des résultats avec un coefficient de variation (CV) inférieur à 30 % lors de la comparaison entre les laboratoires de référence et les laboratoires récepteurs. Des billes de référence lyophilisées ont été expédiées à tous les sites simultanément et restent stables à température ambiante pendant jusqu'à 18 mois, réduisant ainsi la charge logistique. Tous les dosages de prolifération cellulaire sont réalisés dans un environnement GCLP au sein de laboratoires accrédités CAP et certifiés CLIA.